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液相色譜分析中如何才能提高分離度？

來源：測(cè)試GO 時(shí)間：2022-11-15 13:56:05 瀏覽：3054次

下式為液相色譜分析分離度計(jì)算公式：

計(jì)算公式

N：柱效(Efficiency)反映色譜柱性能，柱效越高，分離度越好。在其他條件恒定的情況下，塔板數(shù)增加一倍，分離度僅提高40%。操作中，可通過下面兩種方式增加塔板數(shù)進(jìn)而提高分離度：其一，使用長(zhǎng)柱或雙柱串聯(lián)，但也會(huì)使分離時(shí)間大大延長(zhǎng)；其二，使用細(xì)粒徑填料的色譜柱，但這需要耐更高壓力的液相色譜系統(tǒng)。相比之下后者更為可取。

α：選擇性(selectivity)是指色譜柱-流動(dòng)相體系分離兩個(gè)化合物的能力。選擇性主要與固定相、流動(dòng)相組成以及柱溫等因素有關(guān)，與保留值也密切相關(guān)，其中固定相和流動(dòng)相組成影響較大。

以最常見的反相模式為例，反相柱(包括C18、C8、PH等)是以分配作用對(duì)化合物進(jìn)行保留的，不同化合物的分離是基于它們?cè)阪I合相與流動(dòng)相中分配系數(shù)的差異，如果兩種化合物的水溶性、在烷烴-水體系的分配系數(shù)等方面存在明顯差異，那么這些化合物通常是能夠利用反相柱達(dá)到分離；PH柱對(duì)具有苯環(huán)的化合物具有特殊保留。

正相模式下，硅膠柱、胺基柱、氰基柱與帶有極性基團(tuán)的化合物之間存在極性相互作用，對(duì)化合物的基團(tuán)具有選擇性，常常用于結(jié)構(gòu)類似物、異構(gòu)體化合物的分離。流動(dòng)相方面，降低流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度通常可以增大分離度；而有機(jī)溶劑類型也會(huì)影響分離，比如反相條件下，乙腈和甲醇的選擇性就存在很大差異，這種差異需要在實(shí)踐中摸索，但無論如何，多種溶劑類型帶給我們更多的實(shí)現(xiàn)分離的可能。

k：隨著容量因子k的增大，分離度也隨之增加，這種影響在k值較低時(shí)非常明顯，當(dāng)k值大于10時(shí)，k值增加對(duì)分離度的影響就不再顯著，這就告誡無原則地提高k值以增大分離度是沒有意義的。增加鍵合相密度能夠提高k值；另外改變鍵合基團(tuán)類型也能改變k值，比如在反相色譜中，隨著鍵合相碳鏈長(zhǎng)度的增加，k值逐漸增大。

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