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細胞熱轉(zhuǎn)移實驗（CETSA）

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細胞熱轉(zhuǎn)移實驗（CETSA）

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項目介紹

    CETSA（Cellular Thermal Shift Assay，細胞熱轉(zhuǎn)移實驗）是一種檢測細胞內(nèi)藥物與靶蛋白結(jié)合效率的實驗，其原理是靶蛋白與藥物分子結(jié)合時通常會變得穩(wěn)定。隨著溫度的升高，蛋白會發(fā)生降解；當蛋白結(jié)合藥物后，相同溫度下，未降解蛋白的量會提高，該復(fù)合蛋白的熱熔曲線會右移。其樣品來源可以是細胞，也可以是組織，檢測方法主要有免疫印跡（Western blotting）和蛋白質(zhì)譜（MS）。技術(shù)優(yōu)勢：體外靶點篩選技術(shù)進行蛋白和藥物相互作用研究需要體外純化的活性蛋白質(zhì)，但是蛋白在純化過程中其構(gòu)象可能發(fā)生改變，所獲得的藥物-靶標相互作用信息不能反映活細胞內(nèi)的真實情況。而且很多蛋白很難重組表達純化，進而限制了利用生物物理分子互作技術(shù)鑒定化合物和蛋白的相互作用。CETSA 技術(shù)可以在沒有純化的靶蛋白的情況下開展蛋白和化合物相互作用研究。


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項目案例

細胞熱轉(zhuǎn)移實驗（CETSA）

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