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為什么蛋白質(zhì)印跡條帶大小與預期的不同?
來源:測試GO 時間:2022-09-08 15:04:17 瀏覽:1679次

蛋白質(zhì)免疫印跡法,Western Blot,是在分子生物學、生物化學和免疫遺傳學等領域使用的一個重要實驗技術。其基本原理是利用特異性抗體對經(jīng)凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣本進行染色,并通過分析所染色的細胞部位和染色深度,獲取有關特異蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中表達狀況變化的信號目前已應用于基因在蛋白質(zhì)水平上的表達研究、抗體活性測定,以及疾病早期治療等許多方面。

 實驗過程中的儀器展示圖

蛋白質(zhì)印跡法是一項根據(jù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)而分離蛋白質(zhì)的方法。一般蛋白質(zhì)越小,在膠上的移動速率就越高。但由于移動速率也會受到其它因子的影響,所以,觀測得到的實際條帶大小會和人們預期的結(jié)果有所不同。

 

常見的因素包括:

1.翻譯后修飾:例如磷酸化、糖基化等,可增加蛋白質(zhì)大小。

2.翻譯后切割:例如大多蛋白先被合成為前蛋白,然后被切割產(chǎn)生活性形式,例如前半胱天冬酶。

3.剪接變體和異形體:可變剪接和異形體可能從同一基因產(chǎn)生不同大小的蛋白質(zhì)。

4.相對電荷-氨基酸(帶電和不帶電)多聚體組分,例如蛋白質(zhì)的二聚化。這種情況通常在還原條件下需要防止,但強相互作用會導致較大的條帶出現(xiàn)。


測試狗

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12條評論
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全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具?,F(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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